Apa itu teknologi CRISPR Cas-9 sebenarnya?
pengeditan gen yang telah mengubah cara kita memahami biologi dan dapat digunakan untuk menyembuhkan penyakit, meningkatkan ketahanan tanaman, serta mengubah sifat-sifat pada hewan dan manusia. Teknologi ini berasal dari sistem pertahanan bakteri terhadap virus yang ditemukan pada bakteri Streptococcus pyogenes.
CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) Cas-9 adalah teknologi pengeditan gen yang berbasis pada sistem imun pertahanan bakteri terhadap virus. Sistem CRISPR Cas-9 terdiri dari dua komponen utama, yaitu enzim Cas-9 dan RNA berbasis CRISPR. Teknologi CRISPR-Cas9 bekerja dengan menggunakan protein Cas9 dan RNA kecil yang disebut CRISPR RNA (crRNA) dan trans-activating RNA (tracrRNA)
Bagaimana CRISPR Cas-9 dapat mengenali sequence DNA yang diinginkan?
Cara kerja dari teknologi CRISPR Cas-9 adalah dengan memotong DNA pada tempat yang diinginkan dan mengganti atau menambahkan gen dengan tepat. Proses ini dimulai dengan mengidentifikasi sekuens DNA yang diinginkan untuk diedit dan menentukan bagian mana dari DNA yang harus dipotong. Setelah itu, crRNA dan tracrRNA digabungkan untuk membentuk kompleks RNA Cas-9, yang dapat mengenali dan memotong DNA pada titik-titik yang telah ditentukan sebelumnya. Setelah potongan DNA dibuat, sistem perbaikan DNA yang terjadi pada sel-sel hidup akan memperbaiki potongan DNA tersebut dan memungkinkan perubahan gen.
Mekanisme kerja CRISPR Cas-9 terdiri dari beberapa tahapan, yaitu:
Mekanisme kerja CRISPR Cas-9 dimulai dengan mengidentifikasi fragmen DNA yang ingin dihilangkan atau dimodifikasi, kemudian memasukkan sekuens RNA yang komplementer dengan fragmen DNA tersebut. RNA ini disebut guide RNA (gRNA) dan akan membantu Cas9 untuk memotong fragmen DNA yang diinginkan. Guide RNA memiliki urutan basa yang spesifik, sehingga Cas9 akan menempel pada fragmen DNA yang diinginkan berdasarkan urutan basa yang sama dengan gRNA.
Setelah Cas9 melekat pada fragmen DNA, enzim ini akan memotong dua untai DNA pada lokasi yang spesifik. Pemotongan ini akan menghasilkan "luka" pada DNA, dan sel akan memperbaiki "luka" tersebut melalui dua mekanisme: non-homologous end joining (NHEJ) atau homology-directed repair (HDR). NHEJ akan menyambungkan dua ujung DNA yang putus secara acak, sehingga menghasilkan penghapusan atau mutasi pada lokasi pemotongan. Sedangkan HDR memanfaatkan molekul DNA donor sebagai template untuk memperbaiki "luka" pada DNA, sehingga menghasilkan modifikasi yang diinginkan
Apa Manfaat dan Kegunaan dari Teknologi CRISPR Cas-9 ini?
CRISPR Cas-9 digunakan dalam berbagai aplikasi bioteknologi dan kedokteran, seperti dalam pengobatan penyakit genetik, pengembangan tanaman transgenik, dan pengembangan vaksin.
Sumber referensi :
Doudna, J.A., & Charpentier, E. (2014). The new frontier of genome engineering with CRISPR-Cas9. Science, 346(6213), 1258096. doi: 10.1126/science.1258096
Jinek, M., et al. (2012). A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity. Science, 337(6096), 816-821. doi: 10.1126/science.1225829
National Human Genome Research Institute. (2021). What is CRISPR-Cas9? https://www.genome.gov/about-genomics/fact-sheets/CRISPR-Cas9-FAQs
Komentar
Posting Komentar